紫外可見分光光度計的技術(shù)指標(biāo)
光度準(zhǔn)確度( Photometric Accur acy ) 是一個非常重要的技術(shù)指標(biāo)。任何使用者買一臺紫外可見分光光度計都是為了分析工作, 進(jìn)行分析工作的目的是出數(shù)據(jù), 其基本要求是數(shù)據(jù)要準(zhǔn)確可靠, 這在很大程度上取決于儀器的光度準(zhǔn)確度這個最重要的技術(shù)指標(biāo)及其有關(guān)指標(biāo)。
一、光度準(zhǔn)確度的表示方法
目前, 國際上對紫外可見分光光度計光度準(zhǔn)確度的表示方法主要有兩種:一種是吸光度準(zhǔn)確度( Absorbance Accuracy ) 或吸光度誤差( AbsorbanceEr ror ) , 用AA (或ΔA) 表示; 另一種是透射比準(zhǔn)確度( Transmittance Accuracy) 或透射比誤差, 用TA ( 或ΔT) 表示。國外的紫外可見分光光度計制造商, 絕大多數(shù)都給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) , 并都指出在什么吸光度情況下測量。如美國Varian 公司的Cary500、Lambda900 等儀器, 都給出在1. 0Ab s 時, 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 為±0. 003Ab s。
但國外有少數(shù)儀器制造商在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 的同時, 還給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA(或ΔT)。我國生產(chǎn)紫外可見分光光度計的廠商, 很多都在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 的同時, 也給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA或ΔT)。
一般來說,只給透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA (或ΔT) ,而不給吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 是不合適的, 原因如下:
第一,若給出TA (或ΔT) = ±0. 5%T, 而不講明在什么透射比情況下測試, 就應(yīng)理解為在0~100%T 范圍內(nèi)的任何地方測試都能達(dá)到TA (或ΔT) = ±0. 5% T。但實際上, 若在10% T 處測量, TA ( 或ΔT) = ±0. 5% T 時產(chǎn)生的透射比相對誤差為±5%。而在90%T 處測量, 則TA (或ΔT) = ±0. 5% T 時產(chǎn)生的透射比相對誤差為±0. 56% , 二者相差很大。也就是說, 不可能在0~100%T 范圍內(nèi)的任何地方測試都能達(dá)到TA (或ΔT) = ±0. 5% T。
第二, 用戶在使用紫外可見分光光度計時, 基本上沒有人只用透射比T 和透射比誤差T A ( 或ΔT)來表示光度準(zhǔn)確度和分析測試誤差。相反, 大家一般都用吸光度值A(chǔ) 和吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 來表示分析測試結(jié)果和分析誤差。
第三, 目前國際上絕大多數(shù)使用者, 都是采用吸光度值A(chǔ)和吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 來表示紫外可見分光光度計的分析測試結(jié)果和分析誤差。
第四, 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 和透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT) , 在使用時二者在數(shù)值上會相差很大。若要把TA(或ΔT) = ±0. 5% T 換算成AA ( 或ΔA) , 則在10% T 處( 相當(dāng)在1A 處) ,±0. 5% T 的透射比誤差, 產(chǎn)生的AA ( 或ΔA ) 為±0. 022A, 而在90% T 處(相當(dāng)在0. 0046A 處) , TA ( 或ΔT) = ± 0. 5% T 時產(chǎn)生的AA ( 或ΔA) 為±0. 0024A, 這同樣是一個驚人的差距。因此, 在給出一臺紫外可見分光光度計的光度準(zhǔn)確度時, 不管是用吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 表示,還是用透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT) 表示, 都應(yīng)該指出在多少吸光度或在多少透射比情況下測試。
但是, 目前仍有許多廠商在給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT)時, 都一律寫成±0. 3% T。特別是許多制造廠商對自稱是高檔紫外可見分光光度計的儀器, 基本上都是寫成“ ±0. 3% T ( 0~100% T )”。如日本島津的UV-2401PC、UV-2450PC、UV-2550PC 等紫外可見分光光度計。從理論上講任何高檔紫外可見分光光度計的透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA (或ΔT) 不可能在0~100% T 內(nèi)都能達(dá)到±0. 3%T 的透射比準(zhǔn)確度。
目前,國內(nèi)外都有一些廠商在說明書或儀器樣本中稱“光度準(zhǔn)確度”為“測光精度”, 這種稱謂混淆了準(zhǔn)確( Accuuracy) 和精密度( Pr ecision ) 的概念。準(zhǔn)確度是指的測量值與理論值之差, 該偏差越小說明測量的數(shù)據(jù)越準(zhǔn)確可靠, 或者說光度準(zhǔn)確度越高。而精密度是指的分析測試數(shù)據(jù)的離散性或重復(fù)性, 是指同一操作者, 在一次開機中連續(xù)重復(fù)多次測試某一吸收峰的吸光度值中最大與最小值之差。該差值越小, 說明該儀器的光度重復(fù)性越好。
正確的說法應(yīng)該是紫外可見分光光度計的“光度準(zhǔn)確度” 而不能說成“測光精度”。光度精密度或光度重復(fù)性是指多次測量中的離散性。如3 次或5 次測量中吸光度的最大值與最小值之差即為光度精密度或光度重復(fù)性。而準(zhǔn)確度則是指實際測量的吸光度值與真值或理論值之差。
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